簡要描述:多發(fā)性骨髓瘤*培養(yǎng)基(Human Multiple Myeloma Cell Medium)是一種為促進人源多發(fā)性骨髓瘤原代細胞體外生長而設計的*培養(yǎng)基。
產品名稱:多發(fā)性骨髓瘤*培養(yǎng)基(Human Multiple Myeloma Cell Medium)
產品說明:多發(fā)性骨髓瘤培養(yǎng)基(Human Multiple Myeloma Cell Medium)是一種為促進人源多發(fā)性骨髓瘤原代細胞體外生長而設計的*培養(yǎng)基。它是一種無菌的液體混合系統(tǒng),含有必需和非必需的氨基酸、維生素、有機和無機化合物、生長因子、微量礦物質等。培養(yǎng)基是基于碳酸氫鹽的緩沖體系,在37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中平衡時,pH值為7.4。該培養(yǎng)基的配方可以提供一個理想平衡的體外培養(yǎng)環(huán)境,選擇性地促進人源多發(fā)性骨髓瘤原代細胞的生長。
產品優(yōu)勢:
(1) 培養(yǎng)成功率高
(2) 體外持續(xù)擴增
(3) 保持腫瘤原始病理特征
(4) 藥敏結果宇臨床數據接近
使用說明:
?樣品分離
(1)使用移液器將抗凝管中的外周血或骨髓樣本混勻,轉移至15mL無菌離心管中,1500rpm離心5min。
(2)棄血漿,向血細胞沉淀中加入3~5倍1×PBS稀釋至9mL,充分混勻。
(3)另取15mL離心管,加入6mL人外周血淋巴細胞分離液,傾斜緩慢地加入上述稀釋的血細胞沉淀,與分離液明顯分層,設置轉速400g、升速2、降速0、室溫,離心30min。
(4)離心后,離心管中由上至下細胞分四層(PBS層、環(huán)狀乳白色白細胞層、分離液層、紅細胞層),移液器環(huán)形吸取白細胞層至預先加入5mL1×PBS的15mL離心管中,輕輕混勻洗滌細胞,1500rpm室溫離心3min。
(5)棄上清,加入6mL紅細胞裂解液重懸細胞沉淀,4℃裂解15~20min,中間顛倒混勻一次,1500rpm室溫離心3min。
(6)棄上清,加入1~5mL*培養(yǎng)基重懸細胞沉淀,活細胞計數后(細胞活率至少>50%),并參考表1,接種活細胞于培養(yǎng)瓶/板,置37℃、5%二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
?細胞傳代
(1)鏡下觀察細胞形態(tài),待懸浮細胞長滿至80%~90%時即可傳代。
(2)將細胞懸液轉移至15mL離心管,1500rpm室溫離心3min。
(3)棄上清,以1~2mL培養(yǎng)基重懸細胞,活細胞計數,并參考表1,接種活細胞于培養(yǎng)瓶/板,置37℃、5%二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
注意事項:
1.本產品在使用前需平衡至室溫。
2.原代細胞培養(yǎng)期間盡量避免頻繁搖晃,顯微鏡觀察原代細胞狀態(tài)盡量避免搖晃細胞培養(yǎng)器皿。
3.使用本品惡性漿細胞比例越高(至少>40%),培養(yǎng)成功率越高。4.使用產品時應注意無菌操作,避免污染。
5.本產品中含有血清和原代細胞專用抗生素,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可直接使用。
6.為保持本產品的理想使用效果,不宜將其過夜放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。7.請于保質期內使用本產品,超出保質期,必須放棄使用。
8.本產品僅用于科研用途,不能用于體外診斷。