簡要描述:急性髓系白血病*培養(yǎng)基(Human Acute Myeloid Leukemia Cell Medium)是一種為促進(jìn)人源急性髓系白血病原代細(xì)胞體外牛長而設(shè)計的*培基它是—種無菌的液體混合系統(tǒng),含有心必需和北心必的氨基粉維生素。
產(chǎn)品名稱:急性髓系白血病*培養(yǎng)基(Human Acute Myeloid Leukemia Cell Medium)
產(chǎn)品說明:急性髓系白血病*培養(yǎng)基(Human Acute Myeloid Leukemia Cell Medium)是一種為促進(jìn)人源急性髓系白血病原代細(xì)胞體外牛長而設(shè)計的*培基。它是—種無菌的液體混合系統(tǒng),含有心必需和北心必的氨基粉維生素。有機(jī)和無機(jī)化合物、生長因子、微量礦物質(zhì)等。培養(yǎng)基基于碳酸氫鹽的緩沖體系,在37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中平衡時,pH值為7.4。該培養(yǎng)基的配方,可以提供一個理想平衡的體外培養(yǎng)環(huán)境,選擇性地促進(jìn)人源急性髓白血病原代細(xì)胞的生長。
產(chǎn)品優(yōu)勢:
(1) 培養(yǎng)成功率高
(2) 體外持續(xù)擴(kuò)增
(3) 保持腫瘤原始病理特征
(4) 藥敏結(jié)果宇臨床數(shù)據(jù)接近
使用說明:
?樣品分離
(1)使用移液器將抗凝管中的外周血或骨髓樣本混勻,轉(zhuǎn)移至15mL無菌離心管中,1500rpm離心5min。
(2)棄血漿,向血細(xì)胞沉淀中加入3~5倍1×PBS稀釋至9mL,充分混勻。
(3)另取15mL離心管,加入6mL人外周血淋巴細(xì)胞分離液,傾斜緩慢地加入上述稀釋的血細(xì)胞沉淀,與分離液明顯分層,設(shè)置轉(zhuǎn)速400g、升速2、降速0、溫度25℃,離心30min 。
(4)離心后,離心管中由上至下細(xì)胞分四層(PBS層、環(huán)狀乳白色細(xì)胞層、分離液層、紅細(xì)胞層),移液器環(huán)形吸取白細(xì)胞層至預(yù)先加入5 mL1×PBS的15mL離心管中,輕輕混勻洗滌細(xì)胞,1500rpm室溫離心3min。
(5)棄上清,加入6mL紅細(xì)胞裂解液重懸細(xì)胞沉淀,4 ℃裂解15~20min,中間顛倒混勻一次,1500rpm室溫離心3min。
(6)棄上清,加入1~5mL*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞沉淀,活細(xì)胞計數(shù)后(細(xì)胞活率至少>50%),并參考表1,接種活細(xì)胞于培養(yǎng)瓶/板,置37℃、5%二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
?細(xì)胞傳代
(1)鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),待懸浮細(xì)胞長滿至80%~90% 時即可傳代。
(2)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至15mL離心管,1500rpm室溫離心3min。
(3)棄上清,以1~2mL培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,活細(xì)胞計數(shù),并參考表1,接種活細(xì)胞于培養(yǎng)瓶/板,置37℃、5%二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
1.本產(chǎn)品在使用前需平衡至室溫。
2.原代細(xì)胞培養(yǎng)期間盡量避免頻繁搖晃,顯微鏡觀察原代細(xì)胞狀態(tài)盡量避免搖晃細(xì)胞培養(yǎng)器皿。
3.使用本品急性髓系白血病原代細(xì)胞比例越高(至少>30%),培養(yǎng)成功率越高。4.使用產(chǎn)品時應(yīng)注意無菌操作,避免污染。
5.本產(chǎn)品中含有血清和原代細(xì)胞專用抗生素,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可直接使用。
6.為保持本產(chǎn)品的理想使用效果,不宜將其過夜放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。7.請于保質(zhì)期內(nèi)使用本產(chǎn)品,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
8.本產(chǎn)品僅用于科研用途,不能用于體外診斷。